Differenza tra nitrocellulosa e PVDF | Nitrocellulosa vs PVDF

Differenza chiave - Nitrocellulosa vs PVDF

Blotting occidentale è un metodo che consente la rilevazione e la quantificazione di proteine ​​specifiche da un campione proteico. La affidabilità della tecnica dipende dalla scelta di una corretta membrana per l'assorbimento di proteine ​​dal gel. Ci sono diversi tipi di membrane microporose. Le membrane di nitrocellulosa e PVDF sono due membrane di questo tipo preferite dai ricercatori a causa dei loro attributi speciali rispetto agli altri tipi di membrane. La selezione tra la nitrocellulosa o la PVDF è anche un'altra sfida nella blotting occidentale. Sia nitrocellulosa che PVDF hanno un'elevata capacità di assorbimento delle proteine. La differenza fondamentale tra la nitrocellulosa e la membrana PVDF è che le membrane di nitrocellulosa non hanno la capacità di togliere gli anticorpi e di riutilizzare la membrana per la riproduzione di anticorpi mentre le membrane PVDF hanno capacità di stripping e riutilizzo .

SOMMARIO

1. Panoramica e differenza chiave

2. Che cosa è Nitrocellulosa

3. Che cosa è PVDF

4. Confronto laterale - Nitrocellulosa vs PVDF

5. Sommario

Che cosa è Nitrocellulosa?

Nitrocellulosa è un polimero fabbricato trattando la cellulosa con acido nitrico ed è utilizzato per produrre membrane microporose nella biologia molecolare, specialmente per le tecniche di blotting come la macchia di sud, settentrionale e occidentale. Le dimensioni delle polveri delle membrane di nitrocellulosa variano da 3 a 20 μm. Le membrane microporose di nitrocellulosa facilitano la rilevazione della reazione immunochimica che si verifica sulla superficie della membrana. Pertanto, le membrane di nitrocellulosa vengono spesso utilizzate per l'immobilizzazione delle proteine ​​e la rilevazione di proteine ​​specifiche nella blottatura occidentale. Le membrane di nitrocellulosa possono anche immobilizzare glicoproteine ​​e acidi nucleici.

Le membrane di nitrocellulosa sono preferite nei test di flusso laterale a causa di numerose caratteristiche. Le membrane di nitrocellulosa assorbono le proteine ​​ad un'alta concentrazione. Il solvente utilizzato per bagnare la membrana non diminuisce l'assorbimento della proteina della membrana di nitrocellulosa. Le membrane di nitrocellulosa possono essere facilmente tagliate alla dimensione desiderata del gel e trasferire le proteine ​​dal gel alla membrana mediante trasferimento elettrico o capillare. La nitrocellulosa consente un più veloce flusso di proteine ​​attraverso la membrana con un elevato potenziale di legame. La nitrocellulosa mostra una maggiore forza di manipolazione. Un altro particolare attributo della membrana di nitrocellulosa è che può essere facilmente incollato con adesivi resistenti all'acqua non solvente su vari rivestimenti in plastica.

Figura 01: membrana di nitrocellulosa per blotting occidentale

Che cosa è PVDF?

Il difluoruro di poliviniliduro (PVDF) è fluoropolimero prodotto dalla polimerizzazione di difluoruro di vinilidene e ha un'elevata capacità di immobilizzazione delle proteine. Di conseguenza, le membrane microporose realizzate con PVDF vengono utilizzate nelle tecniche di blotting occidentali per analizzare proteine ​​specifiche dalle miscele di proteine. Le membrane PVDF possono essere utilizzate anche per l'analisi degli aminoacidi e la sequenza delle proteine. La caratteristica più importante della membrana PVDF sulla membrana nitrocellulosa è che può essere facilmente spogliata dagli anticorpi e riutilizzata per le successive sonde anticorpali.

Le membrane PVDF sono più spesse delle membrane di nitrocellulosa; quindi, più resistenti ai danni durante il riutilizzo. Le membrane PVDF sono altamente idrofobiche. Pertanto devono essere imbevuti in metanolo o isopropanolo prima dell'uso.

Qual è la differenza tra Nitrocellulosa e PVDF?

- differenza articolo prima della tabella ->

Nitrocellulosa vs PVDF
Nitrocellulosa è un polimero composto da cellulosa.	PVDF è un fluoropolimero prodotto dalla polimerizzazione di vinilidene difluoride.
Dimensioni dei pori della membrana
Le dimensioni pori tipiche sono 0. 1, 0. 2 o 0. 45μ	Le dimensioni pori tipiche sono 0. 1, 0. 2 o 0. 45μm
Capacità di legame proteico Nitrocellulosa ha una capacità di legame proteico da 80 a 100 μg / cm
2 . PVDF ha una capacità di legame proteico da 170 a 200 μg / cm	2 . Sensibilità
Questo ha una sensibilità bassa rispetto al PVDF.
Questo ha un'alta sensibilità.	Rilevazione di proteine ​​espressamente sottoposte a espressa
Poiché la sensibilità è bassa nelle membrane di nitrocellulosa, non è adatta per la rilevazione di proteine ​​espressamente ridotte.
Questo è più adatto per l'individuazione di proteine ​​espressamente espresse a causa della sua alta sensibilità.	Rumore di fondo
Questo ha un rumore di fondo inferiore
Questo ha un rumore di fondo superiore.	Interazioni con proteine ​​
Le molecole proteiche si legano alle membrane di nitrocellulosa attraverso interazioni idrofobiche.
Le proteine ​​si legano alle membrane PVDF attraverso interazioni idrofobiche e dipolo.	Natura della membrana
Nitrocellulosa è fragile e fragile. Tuttavia, sono disponibili versioni di nitrocellulosa e sono resistenti.
PVDF è più resistente e ha una maggiore resistenza chimica.	Capacità di strisciare e riutilizzare
La nitrocellulosa può avere difficoltà a stripping e reprobing senza perdere il segnale.
PVDF è l'ideale per richiamare e sequenziare applicazioni.	Idoneità
Nitrocellulosa è l'ideale per la rilevazione di proteine ​​a basso peso molecolare.
PVDF è più adatto per rilevare proteine ​​a peso molecolare superiore.	Altri usi
La nitrocellulosa può essere usata per l'analisi dell'acido nucleico e per il blot di punti / slot.
PVDF può essere utilizzato per la sequenza delle proteine ​​e per i sistemi di analisi in fase solida.	Costo
Questo è più economico delle membrane PVDF.
Questo è più costoso delle membrane nitrocellulose.	Necessità di pre-bagnare
Le membrane di nitrocellulosa non necessitano di prelucro con metanolo
Le membrane PVDF richiedono presocco con metanolo.	Sommario - Nitrocellulosa vs PVDF

Le membrane di nitrocellulosa sono state le prime membrane utilizzate commercialmente per il test di flusso laterale. Hanno un'elevata capacità di assorbire le proteine. Pertanto, le membrane di nitrocellulosa vengono utilizzate in blotting occidentale. PVDF è un altro tipo di membrana utilizzata nella blottatura occidentale e ha anche un'elevata capacità di assorbimento delle proteine. Entrambe le tipologie sono utilizzate nella blotting occidentale per l'analisi proteica. Tuttavia, le membrane PVDF hanno più caratteristiche speciali, rendendole più adatte alle membrane nitrocellulose per la blotting occidentale. Tuttavia, le membrane di nitrocellulosa sono più adatte per la rilevazione di proteine ​​ponderate a basso peso molecolare, le membrane PVDF sono più adatte per la rilevazione di proteine ​​ad alto peso molecolare. Questa è la differenza tra le membrane di nitrocellulosa e PVDF.

Immagine gentile:

1. "Western blot transfer" Da Bensaccount in Wikipedia in lingua inglese (CC BY 3. 0) via Wikimedia Commemorativa

Riferimento:

1. Luque-Garcia, Jose L., Ge Zhou, Tung-Tien Sun e Thomas A. Neubert. "Uso delle membrane di Nitrocellulosa per la caratterizzazione della proteina mediante la matrice assistita di desorbimento laser / ionizzazione spettrometria di massa. " Chimica analitica. U. S. Biblioteca Nazionale di Medicina, 15 luglio 2006. Web. 28 marzo 2017

2. "Marcatori molecolari e biotecnologie vegetali. "Google Libri. N. p., n. d. Web. 28 marzo 2017

3. Lunedì 8 aprile 2013 Tweet. "La magia nella membrana: scegliere saggiamente per i risultati Best Western Blot. "Biocompare. N. p., 08 Apr. 2013. Web. 28 marzo 2017