Differenza tra PBS e PBS di Dulbecco Differenza tra

Anonim

DPBS vs PBS

PBS, o soluzione salina tamponata con fosfato e salina tamponata con fosfato (DPBS) di Dulbecco, sono saline tamponate utilizzate negli studi biologici. PBS e DPBS sono utilizzati nella ricerca che coinvolge le cellule. La concentrazione di ioni della soluzione e l'osmolarità sono isotoniche, cioè sono compatibili con il corpo umano. Il tampone facilita la fornitura e preserva un pH stabile di 7. 2-7. 6.

Non vi è alcuna differenza significativa tra PBS e DPBS. Entrambi contengono fosfato di sodio, sodio cloruro e, quando richiesto, fosfato di potassio e cloruro di potassio. Altri preparati, come DPBS, possono contenere o meno calcio e magnesio. PBS e DPBS hanno numerose applicazioni perché non sono nocive per le celle. Sia PBS che DPBS possono essere utilizzati per sciacquare strumenti o contenitori contaminati da cellule. Inoltre, entrambi possono essere utilizzati in sostanze diluenti. Le molecole d'acqua all'interno di diluenti come le proteine ​​vengono fermate e prosciugate. L'acqua che si combina con la sostanza impedisce alla sostanza di subire alterazioni conformazionali come la denaturazione. Le soluzioni di calcio e magnesio possono contenere l'attività della tripsina. Nell'ellipsometria, l'assorbimento delle proteine ​​può essere misurato prendendo uno spettro di base con l'uso di PBS.

È possibile utilizzare soluzione salina tamponata con fosfato con additivi come EDTA per separare le celle raggruppate. La precipitazione si forma quando lo zinco, un metallo bivalente, viene aggiunto a PBS, motivo per cui non può essere aggiunto a cellule separate. Il buffer di Good viene utilizzato al posto dello zinco in questo tipo di situazione.

La soluzione salina tamponata con fosfato e la soluzione salina tamponata con fosfato di Dulbecco vengono preparate in numerosi modi. Un modo per prepararlo è sciogliendo 800 g. cloruro di sodio, 20 g. cloruro di potassio, 2 molecole di acqua, 24 g. fosfato di potassio e 144 g. fosfato di sodio in 8 litri di acqua distillata. Il risultato sarà di 10 litri di PBS a 10x. Misurare direttamente il pH del PBS utilizzando un pH-metro quando si preparano soluzioni tamponate. Il pH della soluzione è regolabile usando l'idrossido di sodio o l'acido cloridrico. La soluzione salina tamponata con fosfato viene preparata con una concentrazione finale di 10 mM di fosfato, 137 mM di cloruro di sodio, 2. 7 mM di cloruro di potassio e un pH di 7. 4. Fritsch, Sambrook e Maniatis hanno la propria strada nella preparazione del tampone soluzioni nel loro libro intitolato "Molecular Cloning. "Di conseguenza, per un litro di 1x PBS, iniziare la preparazione con 800 ml. di acqua che viene distillata. Includere 8 g. di cloruro di sodio e di 0. 2 g. di cloruro di potassio. 1. 44 g. di fosfato di sodio viene quindi aggiunto seguito da 0. 24 g. di fosfato di potassio. Inserire acido cloridrico per regolare il pH a 7. 4. Per ottenere 1 litro di PBS, aggiungere altra acqua distillata fino al livellamento fino a 1 litro.Distribuire la soluzione risultante in un'aliquota e utilizzare l'autoclave per sterilizzare la soluzione. Regolare l'autoclave a 121 ° C e sterilizzarla in autoclave per 20 minuti nel suo ciclo liquido. Successivamente, conservare la soluzione a temperatura ambiente.

Sebbene la soluzione salina tamponata con fosfato e la soluzione salina tamponata con fosfato di Dulbecco siano preparate in molti modi, i contenuti sono sempre gli stessi. Pertanto, indipendentemente da come viene preparato, i risultati e gli usi sono sempre gli stessi.

Riepilogo:

1. PBS, o soluzione salina tamponata con fosfato, e la soluzione salina tamponata con fosfato di Dulbecco (DPBS), sono saline tamponate utilizzate negli studi biologici.

2. La concentrazione di ioni della soluzione e l'osmolarità sono isotoniche, cioè sono compatibili con il corpo umano. Il tampone facilita la fornitura e preserva un pH stabile di 7. 2-7. 6.

3. Non vi è alcuna differenza significativa tra PBS e DPBS. Entrambi contengono fosfato di sodio, sodio cloruro e, quando richiesto, fosfato di potassio e cloruro di potassio. Altri preparati, come DPBS, possono contenere o meno calcio e magnesio.

4. Sia PBS che DPBS possono essere utilizzati per sciacquare strumenti o contenitori contaminati da cellule. Inoltre, entrambi possono essere utilizzati in sostanze diluenti. Le molecole d'acqua all'interno di diluenti come le proteine ​​vengono fermate e prosciugate. L'acqua che si combina con la sostanza impedisce alla sostanza di subire alterazioni conformazionali come la denaturazione. Le soluzioni di calcio e magnesio possono contenere l'attività della tripsina. Nell'ellipsometria, l'assorbimento delle proteine ​​può essere misurato prendendo uno spettro di base con l'uso di PBS.

5. Salina tamponata con fosfato con additivi come EDTA può essere usata per separare le cellule raggruppate. La precipitazione si forma quando lo zinco, un metallo bivalente, viene aggiunto a PBS, motivo per cui non può essere aggiunto a cellule separate. Il buffer di Good viene utilizzato al posto dello zinco in questo tipo di situazione.

6. PBS e DPBS sono preparati in numerosi modi. Sebbene la soluzione salina tamponata con fosfato e la soluzione salina tamponata con fosfato di Dulbecco siano preparate in molti modi, i contenuti sono sempre gli stessi. Pertanto, indipendentemente da come viene preparato, i risultati e gli usi sono sempre gli stessi.