Trasformazione vs transfezione | Differenza fra trasformazione e transfezione
Trasformazione e trasfezione
La trasformazione e la trasfezione sono due semplici tecniche utilizzate per introdurre un gene straniero in una cellula ospite. Tuttavia, queste tecniche dipendono dal tipo di sistemi host o vettoriali.
Che cos'è la trasformazione delle cellule?
La trasformazione è la tecnica utilizzata per introdurre i geni nelle cellule batteriche e lievito. Questa tecnica di solito causa modifiche ereditarie nei geni, e quindi l'espressione del gene è permanente. La trasformazione batterica fu introdotta per la prima volta nel 1928 da Frederick Griffith. All'inizio degli anni '70, questa tecnica è stata utilizzata in
E. coli. Durante il processo di trasformazione di E. coli, le cellule sono imbevute in soluzione fredda di CaCl 2 . Questo passo rende E. coli cellule competenti. Successivamente, le cellule competenti vengono mescolate con il plasmide DNA e vengono incubate su ghiaccio per 20-30 min. Poi viene somministrato un breve scoscio di calore per consentire il trasferimento del DNA nella cellula. Infine, le cellule vengono collocate in un brodo nutritivo e incubate a 37 ° C per 60-90 minuti per stabilire i plasmidi. Una volta completati questi passaggi, le cellule trasformate possono essere collocate su un supporto appropriato per la propagazione delle cellule. Poiché la trasformazione è considerata una tecnica inefficiente, non può essere utilizzata per la preparazione di banche di cloni.
Che cos'è la trasfezione cellulare?La trasfezione è un metodo di introduzione di un gene straniero, di solito, nelle cellule di mammiferi. Ci sono due metodi di trasfezione; vale a dire, la transizione transitoria e la trasfezione stabile. Nella transizione transitoria, l'espressione genica è disponibile per un tempo limitato; quindi, l'alterazione del gene provoca un'espressione temporanea. Questo metodo di trasfezione è semplice e veloce; di conseguenza può essere utilizzato in modo ordinario. Uno svantaggio della transfiezione transitoria è la difficoltà di applicare sistemi di sintesi della proteina su larga scala.
Qual è la differenza tra Trasformazione e Trasfezione?
• La trasformazione è l'introduzione di un gene in una cellula prokaryotica (batterica e lievito), mentre la trasfezione è solitamente chiamata l'introduzione di un gene in una cellula di mammiferi.
